離心機(jī)是一種高速旋轉(zhuǎn)機(jī)械,它是利用離心力,不同物質(zhì)在離心場(chǎng)中沉淀速度的差異,對(duì)混合溶液進(jìn)行快速分離的專(zhuān)門(mén)設(shè)備,是一種將裝有樣品溶液的離心管、瓶或袋韻轉(zhuǎn)頭置于離心軸上,利用轉(zhuǎn)頭繞軸高速旋轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的強(qiáng)大離心力,使樣品中不同性質(zhì)顆粒相互分離的特殊裝置,可以實(shí)現(xiàn)樣品的分析、分離。以下是離心機(jī)的技術(shù)、分類(lèi)和性能綜述。
一、簡(jiǎn)介
離心機(jī)是利用離心力,分離液體與固體顆?;蛞后w與液體的混合物中各組分的機(jī)械。離心機(jī)主要用于將懸浮液中的固體顆粒與液體分開(kāi),或?qū)⑷闈嵋褐袃煞N密度不同,又互不相溶的液體分開(kāi)(例如從牛奶中分離出奶油);它也可用于排除濕固體中的液體,例如用洗衣機(jī)甩干濕衣服;特殊的超速管式分離機(jī)還可分離不同密度的氣體混合物;利用不同密度或粒度的固體顆粒在液體中沉降速度不同的特點(diǎn),有的沉降離心機(jī)還可對(duì)固體顆粒按密度或粒度進(jìn)行分級(jí)。
結(jié)構(gòu)主要由電機(jī)驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)、制冷系統(tǒng)、機(jī)械系統(tǒng)、轉(zhuǎn)頭和系統(tǒng)控制等幾部分組成。
二、離心機(jī)的分類(lèi)
離心機(jī)的式樣和型號(hào)很多,有國(guó)產(chǎn)的和進(jìn)口的,按用途可分為分析式離心機(jī)和制備式離心機(jī);
按轉(zhuǎn)速可劃分為:
普通離心機(jī)(低速):<8000r/min;
高速離心機(jī):8000 ~30000r/rain;
離心機(jī):30000 ~80000r/min;
速離心機(jī):>80000r/min;
按結(jié)構(gòu)分類(lèi):
一般高速和低速離心機(jī)根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行分類(lèi),品種繁多,各廠家命名也無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)??煞譃榕_(tái)式離心機(jī)、多管微量臺(tái)式離心機(jī)、細(xì)胞涂片離心機(jī)、血液洗滌臺(tái)式離心機(jī)、高速冷凍離心機(jī)、大容量低速冷凍離心機(jī)、低速冷凍離心機(jī)、臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)、臺(tái)式低速自動(dòng)平衡離心機(jī)等。另外國(guó)外還有三聯(lián)式(五聯(lián)式)高速冷凍離心機(jī),專(zhuān)作連續(xù)離心用。
按體積和容量一般可分為:落地式離心機(jī),臺(tái)式離心機(jī)和迷你(掌上)離心機(jī)。落地式的處理容量大體積大,迷你離心機(jī)處理容量小體積小。
可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)需要,選擇不同容量、不同轉(zhuǎn)速、不同溫度控制的離心機(jī)。
三、轉(zhuǎn)頭
轉(zhuǎn)子是離心機(jī)的主要配件。簡(jiǎn)單的說(shuō),可以將離心機(jī)分為主機(jī)和可拆卸的轉(zhuǎn)子(轉(zhuǎn)頭)兩部分,一個(gè)多功能主機(jī)通??梢耘涠鄠€(gè)轉(zhuǎn)子,靠不同型號(hào)的轉(zhuǎn)子來(lái)滿足不同的需要來(lái)實(shí)現(xiàn)其“多功能”的,這樣可以有效的降低采購(gòu)成本,但是選購(gòu)的時(shí)候需要注意選擇轉(zhuǎn)子拆裝方便的離心機(jī),一般的離心機(jī)轉(zhuǎn)子與主軸直接配合,廠家為了降低噪音往往把主機(jī)和轉(zhuǎn)子的配合度做得相當(dāng)高,但這樣大的弊端就是轉(zhuǎn)子容易與主軸咬死造成拆卸不方便,另外,這種轉(zhuǎn)子與電機(jī)的配合方式還存在很強(qiáng)的方向性,當(dāng)轉(zhuǎn)子方向與電機(jī)主軸配合發(fā)生偏移時(shí)會(huì)造成較大的噪音影響整機(jī)的使用壽命,嚴(yán)重的話將會(huì)造成主軸斷裂,轉(zhuǎn)子爆炸。常用的轉(zhuǎn)子包括固定角轉(zhuǎn)子和水平轉(zhuǎn)子。轉(zhuǎn)子越齊當(dāng)然功能越全,所以選擇轉(zhuǎn)子通常根據(jù)常用樣品的容量及離心的條件選擇,通常水平轉(zhuǎn)頭和角轉(zhuǎn)頭各一個(gè),大容量(相對(duì)較低速)的轉(zhuǎn)子和小容量高轉(zhuǎn)速的轉(zhuǎn)子各一個(gè),再根據(jù)工作中的不同需要選擇其他轉(zhuǎn)子。
⑴ 角式轉(zhuǎn)頭:角式轉(zhuǎn)頭是指離心管腔與轉(zhuǎn)軸成一定傾角的轉(zhuǎn)頭。它是由一塊完整的金屬制成的,其上有4~12個(gè)裝離心管用的機(jī)制孔穴,即離心管腔,孔穴的中心軸與旋轉(zhuǎn)軸之間的角度在20~40度之間,角度越大沉降越結(jié)實(shí),分離效果越好。這種轉(zhuǎn)頭的優(yōu)點(diǎn)是具有較大的容量,且低,運(yùn)轉(zhuǎn)平衡,壽命較長(zhǎng),顆粒在沉降時(shí)先沿離心力方向撞向離心管,然后再沿管壁滑向管底,因此管的一側(cè)就會(huì)出現(xiàn)顆粒沉積,此現(xiàn)象稱(chēng)為“壁效應(yīng)”,壁效應(yīng)容易使沉降顆粒受突然變速所產(chǎn)生的對(duì)流擾亂,影響分離效果。
角轉(zhuǎn)子中的離心管能夠保持固定的角度離心,可以使用較高的轉(zhuǎn)速,離心后沉淀位于管底的斜面。較大容量的轉(zhuǎn)子通??梢耘洳煌摹斑m配器”來(lái)“固定”小容量的樣品管,例如6 x 85ml的轉(zhuǎn)子每孔可以放置85ml的離心管,也可以放50ml或者15—20ml的離心管,實(shí)現(xiàn)一物多用;但是由于重量的負(fù)擔(dān),大容量轉(zhuǎn)子的高轉(zhuǎn)速相對(duì)小的要低一些,因而還要考慮高離心力是否能滿足實(shí)驗(yàn)要求。高轉(zhuǎn)速的轉(zhuǎn)頭通常是適配2ml離心管的轉(zhuǎn)子,有時(shí)一個(gè)轉(zhuǎn)子的價(jià)格就幾乎可以買(mǎi)多一個(gè)小離心機(jī),可以另外購(gòu)置小型臺(tái)式高速離心機(jī),這樣還可以減少昂貴設(shè)備的損耗。有的小型臺(tái)式的高速離心機(jī)也提供大小不同的固定角轉(zhuǎn)子(分別配合0.5ml和2ml/1.5ml離心指管,其實(shí),除非是經(jīng)常固定使用0.5ml離心管且每次離心的樣品量比較大,一般選擇一個(gè)2ml/1.5ml轉(zhuǎn)子,配合適配器(有適合0.2ml、0.4ml、0.5ml管的適配器)就可以滿足需要。如果常用PCR條管的還要考慮配一個(gè)8聯(lián)管的轉(zhuǎn)子比較方便。
角轉(zhuǎn)子配的蓋子有助于減少摩擦、降低噪音和防止意外,使用角轉(zhuǎn)子一定要蓋蓋,如未蓋離心腔內(nèi)會(huì)產(chǎn)生很大的渦流阻力和摩擦升溫,這等于給離心機(jī)的電機(jī)和制冷機(jī)增加了額外負(fù)擔(dān),影響離心機(jī)的使用壽命。另外有一種氣密性轉(zhuǎn)子可以進(jìn)行氣密性離心,防止意外泄漏,對(duì)于改善實(shí)驗(yàn)環(huán)境很重要。
⑵ 水平式轉(zhuǎn)頭:這種轉(zhuǎn)頭是由吊著的4或6個(gè)自由活動(dòng)的吊籃(離心套管)構(gòu)成。當(dāng)轉(zhuǎn)頭靜止時(shí),吊桶垂直懸掛,當(dāng)轉(zhuǎn)頭轉(zhuǎn)速達(dá)到每分鐘200到800轉(zhuǎn)時(shí),吊桶蕩至水平位置,這種轉(zhuǎn)頭適合做密度梯度區(qū)帶離心,其優(yōu)點(diǎn)是梯度物質(zhì)可放在保持垂直的離心管中,離心時(shí)被分離的樣品帶垂直于離心管縱軸,而不像角式轉(zhuǎn)頭中樣品沉淀物的界面與離心管成一定角度,因而有利于離心結(jié)束后由管內(nèi)分層取出已分離的各樣品帶。其缺點(diǎn)是顆粒沉降距離長(zhǎng),離心所需時(shí)間也長(zhǎng)。
水平轉(zhuǎn)子配有4或6個(gè)吊籃,靜止時(shí)垂直掛在轉(zhuǎn)子上,吊籃有不同的適配器以滿足不同容量的離心管的需要。當(dāng)轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速超過(guò)600rpm后離心管達(dá)到水平位置,樣品沉降方向是沿離心管軸向移動(dòng),沉降在管底,便于收集。因?yàn)椴蝗绻潭ń寝D(zhuǎn)子穩(wěn)固,水平吊籃高轉(zhuǎn)速相比固定角轉(zhuǎn)子要低很多,限于低速離心的范圍。吊籃有不同的適配器,可以放置各種類(lèi)型的離心管,甚至滿足平板離心的需要——例如一些品牌的大容量離心機(jī)可配多用途適配器,使得多個(gè)微孔板或者培養(yǎng)板、深孔板、PCR板、玻片盒、大規(guī)模核酸純化試劑盒的純化板、甚至細(xì)胞培養(yǎng)瓶的離心可以和大容量的離心瓶公用同一個(gè)水平轉(zhuǎn)子,有助于節(jié)約經(jīng)費(fèi)同時(shí)滿足多樣化的需求。所以說(shuō)選擇適配范圍越寬的轉(zhuǎn)子越好。
水平轉(zhuǎn)子可以使離心沉淀在管底而非管壁的斜面上,但是水平轉(zhuǎn)子的轉(zhuǎn)速往往較同型號(hào)的固定轉(zhuǎn)子慢很多——有時(shí)無(wú)法滿足高速離心的需要,對(duì)于要求高速但是又要求沉淀在管底的微量樣品就可以選擇鼓型轉(zhuǎn)子,離心指管水平固定在這種外型不甚美觀的“圓餅干盒子”里面的支架上,可以以相對(duì)較高的速度離心(14000rmp)又保證沉淀聚集在管底。
⑶ 區(qū)帶轉(zhuǎn)頭:區(qū)帶轉(zhuǎn)頭無(wú)離心管,主要由一個(gè)轉(zhuǎn)子桶和可旋開(kāi)的頂蓋組成,轉(zhuǎn)子桶中裝有十字型隔板裝置,把桶內(nèi)分隔成四個(gè)或多個(gè)扇形小室,隔板內(nèi)有導(dǎo)管,梯度液或樣品液從轉(zhuǎn)頭的進(jìn)液管泵入,通過(guò)這些導(dǎo)管分布到轉(zhuǎn)子四周,轉(zhuǎn)頭內(nèi)的隔板可保持樣品帶和梯度介質(zhì)的穩(wěn)定。沉降的樣品顆粒在區(qū)帶轉(zhuǎn)頭中的沉降情況不同于角式和外擺式轉(zhuǎn)頭,在徑向的散射離心力作用下,顆粒的沉降距離不變,因此區(qū)帶轉(zhuǎn)頭的“壁效應(yīng)”極小,可以避免區(qū)帶和沉降顆粒的紊亂,分離效果好,而且還有轉(zhuǎn)速高,容量大,回收梯度容易和不影響分辨率的優(yōu)點(diǎn),使超離心用于制備和工業(yè)生產(chǎn)成為可能。區(qū)帶轉(zhuǎn)頭的缺點(diǎn)是樣品和介質(zhì)直接接觸轉(zhuǎn)頭,耐腐蝕要求高,操作復(fù)雜。
⑷ 垂直轉(zhuǎn)頭:其離心管是垂直放置,樣品顆粒的沉降距離短,離心所需時(shí)間也短,適合用于密度梯度區(qū)帶離心,離心結(jié)束后液面和樣品區(qū)帶要作九十度轉(zhuǎn)向,因而降速要慢。
⑸ 連續(xù)流動(dòng)轉(zhuǎn)頭:可用于大量培養(yǎng)液或提取液的濃縮與分離,轉(zhuǎn)頭與區(qū)帶轉(zhuǎn)頭類(lèi)似,由轉(zhuǎn)子桶和有入口和出口的轉(zhuǎn)頭蓋及附屬裝置組成,離心時(shí)樣品液由入口連續(xù)流入轉(zhuǎn)頭,在離心力作用下,懸浮顆粒沉降于轉(zhuǎn)子桶壁,上清液由出口流出。
越來(lái)越多新型轉(zhuǎn)子應(yīng)新的需要而誕生。轉(zhuǎn)子的材質(zhì)也從重量輕、強(qiáng)度高、造價(jià)低的鋁合金不斷創(chuàng)新,出現(xiàn)了碳纖維轉(zhuǎn)子、塑料轉(zhuǎn)子等等超輕轉(zhuǎn)子,還有采用鋁合金模具壓成空心角轉(zhuǎn)從而有效減輕重量,從而減輕電機(jī)的負(fù)荷及增加樣品的容量。現(xiàn)在的轉(zhuǎn)子和適配器、蓋子多數(shù)都可以直接高溫消毒,抗腐耐溫性也大大提高,可以滿足特殊的需要。不過(guò)轉(zhuǎn)子在高速運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí),內(nèi)部會(huì)產(chǎn)生離心應(yīng)力,因而都有一定的使用,需要參照說(shuō)明書(shū)正確保管和使用。當(dāng)離心應(yīng)力超過(guò)一定的限度后,將引起轉(zhuǎn)頭過(guò)早損壞,甚至發(fā)生意外,應(yīng)嚴(yán)格遵循廠家的說(shuō)明。
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